輪狀病毒是一種雙鏈核糖核酸病毒，屬于呼腸孤病毒科。它是引起嬰幼兒腹瀉的最常見原因，幾乎每個(gè)兒童在約五歲時(shí)都經(jīng)歷至少一次輪狀病毒感染。輪狀病毒是借由糞口途徑傳染的。它會(huì)感染小腸壁上的腸黏膜細(xì)胞并且產(chǎn)生腸毒素，腸毒素會(huì)引起腸胃炎，導(dǎo)致嚴(yán)重的腹瀉，有時(shí)候甚至?xí)驗(yàn)槊撍鴮?dǎo)致死亡。然而，每一次感染后人體免疫力會(huì)逐漸增強(qiáng)，因此之后再次感染的影響就會(huì)減輕，到成年階段就很少受其影響。

輪狀病毒總共有八個(gè)種，以英文字母編號(hào)為A、B、C、D、E、F、G與H。其中，A種是最為常見的一種，超過90%人類輪狀病毒感染是由該種造成。輪狀病毒的基因組包括了11條獨(dú)特的核糖核酸雙螺旋分子，總共有18,555個(gè)核苷堿基對(duì)，核糖核酸外圍則是包圍了三層二十面體的蛋白質(zhì)殼體。病毒顆粒大約直徑~70 nm，無病毒囊膜。

輪狀病毒有六個(gè)病毒蛋白質(zhì)，其架構(gòu)了整個(gè)病毒顆粒。這些“結(jié)構(gòu)性”的蛋白質(zhì)分別被稱為VP1、VP2、VP3、VP4、VP6與VP7。其中，VP4蛋白質(zhì)位于病毒體的表面，形成刺突。它連接細(xì)胞表面的受體分子，即影響細(xì)胞附著，并且驅(qū)使病毒進(jìn)入細(xì)胞。在病毒有傳染性之前，VP4蛋白質(zhì)會(huì)被蛋白酶改變成VP5與VP8蛋白質(zhì)。VP4蛋白質(zhì)決定了病毒的毒性。除了這些結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì)之外，還有六個(gè)非結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì)NSP1、NSP2、NSP3、NSP4、NSP5與NSP6，這六個(gè)蛋白質(zhì)僅在輪狀病毒感染的細(xì)胞中產(chǎn)生，沒有構(gòu)成病毒體的結(jié)構(gòu)。

目前，針對(duì)輪狀病毒的疫苗主要為減毒活疫苗，包括葛蘭素史克的單價(jià)減毒活疫苗Rotarix、以及在國(guó)內(nèi)獲批的默沙東的5價(jià)重配減毒活疫苗RotaTeq、蘭州生物制品研究所生產(chǎn)的單價(jià)減毒活疫苗羅特威以及三價(jià)重配輪狀病毒減毒活疫苗瑞特威。

高壓均質(zhì)機(jī)大規(guī)模提取輪狀病毒

在已獲批的輪狀病毒疫苗產(chǎn)品中，Vero細(xì)胞是主要的生產(chǎn)宿主細(xì)胞，其是一種貼壁依賴型細(xì)胞，已被廣泛用于病毒的分離、培養(yǎng)和疫苗生產(chǎn)，常使用T瓶或細(xì)胞工廠進(jìn)行靜態(tài)培養(yǎng)，并通過規(guī)模擴(kuò)展來提高產(chǎn)量。

輪狀病毒與其它劇烈式病毒不同，它是一種溫和式病毒，不易從細(xì)胞內(nèi)釋放出來，可使用反復(fù)凍融，如37℃/-20℃，然后離心收集含有病毒的上清液；或者，可以使用高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行細(xì)胞裂解，以釋放病毒，待處理完成后，使用0.45 μm過濾器進(jìn)行澄清過濾。使用高壓均質(zhì)進(jìn)行機(jī)械裂解，能夠在短時(shí)間內(nèi)有效地破碎細(xì)胞，釋放細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)，且具有良好的可放大性，不需要添加額外的試劑。

ATS提供全系列的生物專用型高壓均質(zhì)機(jī)產(chǎn)品，可支持從實(shí)驗(yàn)室到生產(chǎn)的不同規(guī)模應(yīng)用，最高處理速度可達(dá)4,000 L/H。結(jié)合參數(shù)優(yōu)化，包括壓力和通過次數(shù)，該系列設(shè)備可實(shí)現(xiàn)高破碎率，一次破碎可達(dá)95%以上。系統(tǒng)采用特殊的進(jìn)料閥設(shè)計(jì)，無需排氣，直接進(jìn)料，結(jié)合變頻控制系統(tǒng)，可根據(jù)要求調(diào)節(jié)流量。同時(shí)，設(shè)備內(nèi)置冷卻系統(tǒng)，直接吸收破碎產(chǎn)熱。設(shè)備符合GMP設(shè)計(jì)，可連接配置CIP/SIP，并可選配氣動(dòng)加壓、PLC控制等功能。